Método ELISA

KIT ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) – ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO
 
UM ENSAIO QUE SE UTILIZA DE MICROPLACAS COM 96 CAVIDADES REVESTIDAS
 
Existem diferentes tipos de ensaios que se utilizam da metodologia ELISA:
ELISA DIRETO, ELISA INDIRETO, ELISA “SANDWICH”, ELISA POR COMPETIÇÃO.
Abaixo estão descritas as técnicas.
 
ELISA direto:
O antígeno é imobilizado (impregnado) na placa.
Pipeta-se um anticorpo ligado a uma enzima uma enzina (HRP, Biotina, etc.)
 
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ELISA indireto:
O antígeno é imobilizado na placa, é uma detecção em 2 passos. Primeiro um anticorpo primário é ligado ao antígeno específico depois é adicionado um segundo anticorpo ligado à uma enzima que se liga ao anticorpo primário.
 


ELISA Sanduiche:
O anticorpo é impregnado à placa, o antígeno se liga à ele, posterirormente é adicionado outro anticorpo ligado à enzima para se ligar em um outro epítopo do antígeno e formar o complexo.
 


ELISA por competição:
O antígeno ou anticorpo está impregnado à placa e o local de ligação tem a competição do antígeno ou anticorpo da amostra com um outro pipetado no kit. Esta competição torna o valor da leitura inversamente proporcional, pois quanto menos quantidade da substância a ser identificada, menos sítios de ligação serão utilizados por elas, os outros sítios de ligação serão ocupados pelas substâncias que foram adicionadas.

Todos os tipos:



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